產(chǎn)品概述

人的瘦素蛋白是一個(gè)16KDa含有146個(gè)氨基酸殘基的沒(méi)有糖基化修飾的多肽，一開(kāi)始使用基因圖譜技術(shù)從肥胖老鼠的基因中定位到一個(gè)突變，這個(gè)基因就是編碼瘦素蛋白的基因。由于它能夠降低脂肪含量人們把它命名為瘦素（OB），它在不同種屬中有很高的保守性，成熟人的瘦素蛋白與小鼠和大鼠分別有87%和84%的同源性。瘦素通常被稱(chēng)為OB蛋白質(zhì)，這種蛋白質(zhì)是ob基因（obese gene）的產(chǎn)物。人的瘦素被發(fā)現(xiàn)無(wú)論在小鼠或者大鼠的系統(tǒng)中都是有活性的。瘦素的表達(dá)是非常有限的，僅在脂肪細(xì)胞中表達(dá)。瘦素蛋白主要被認(rèn)為調(diào)控降低食欲和能量消耗。當(dāng)脂肪細(xì)胞攝入大量卡路里的時(shí)候，它的大小會(huì)變大，從而釋放出瘦素蛋白。大的脂肪細(xì)胞說(shuō)明短期內(nèi)不需要能量攝入，循環(huán)的瘦素蛋白給控制食欲和代謝速率的下丘腦傳達(dá)了抑制食欲的信號(hào)。盡管在人類(lèi)和小鼠中瘦素的循環(huán)水平和體重呈現(xiàn)正相關(guān)性，但是許多因子在大腦和周邊組織中與體重減輕和代謝也有很大關(guān)系。除了它在脂肪代謝中起的作用之外，瘦素在造血和腎上腺皮質(zhì)功能中也發(fā)揮重要作用。

產(chǎn)品原理

本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。抗人Leptin單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的Leptin會(huì)與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去形成免疫復(fù)合物；加入生物素化的抗人Leptin抗體，生物素化抗人Leptin抗體與酶標(biāo)板上結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的Leptin結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去；加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親合素，親合素與生物素特異性結(jié)合，游離的成分被洗去。加入顯色底物（顯色劑），若反應(yīng)孔中有Leptin，辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑變藍(lán)，加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值， Leptin濃度與OD₄₅₀值之間呈正相關(guān)，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Leptin濃度。

產(chǎn)品性能

1. 靈敏度：最小可測(cè)人Leptin達(dá)30pg/ml。

2. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。

產(chǎn)品組分及儲(chǔ)存條件

試驗(yàn)所需自備儀器和試劑:

1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測(cè)波長(zhǎng)濾光片，570nm或630nm校正波長(zhǎng)濾光片)。

2. 高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10μl，2-20μl，20-200μl，200-1000μl。

3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標(biāo)紙。

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