產(chǎn)品概述
白介素 10(IL-10),初始被命名為細胞因子合成抑制因子(CSIF),最初被認為是在單核細胞/巨噬細胞等抗原刺激細胞存在時,鼠的 Th2 抑制了被 Th1 表達的細胞因子的產(chǎn)生。與鼠 IL-10 對應(yīng)的人同類物隨后通過交叉雜交的方法被克隆。小鼠、大鼠與人 IL-10 的 cDNA 編碼 178 氨基酸組成的前體分子,當(dāng)疏水信號肽被剪切后生成160 個氨基酸組成的成熟蛋白質(zhì)。在這三個物種中, IL-10 分子蛋白質(zhì)序列至少有 73%同源性。 與小鼠 IL-10 相比,人 IL-10 似乎不發(fā)生糖基化。在溶液中,小鼠與人的 IL-10 存在非共價連接的同型二聚體。 盡管人 IL-10對小鼠細胞有活性,但小鼠 IL-10 對人細胞沒有顯示出種屬交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。抗人IL-10單抗包被于酶標板上,標本和標準品中的IL-10會與單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入生物素化的抗人IL-10抗體,生物素化抗人IL-10抗體與酶標板上結(jié)合的標準品或樣本中的IL-10結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-10,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍,加終止液變黃。在450nm處測OD值,IL-10濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過繪制標準曲線求出標本中IL-10濃度。
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