產(chǎn)品概述
白細(xì)胞介素10(IL-10),也稱細(xì)胞合成抑制因子(CSIF),是一種具有強(qiáng)大免疫調(diào)節(jié)作用的多效因子,它具有細(xì)胞類型多樣性。在激活的B細(xì)胞中,IL-10可以誘導(dǎo)IgG形成血細(xì)胞和分泌物,或者在TGF-β1和(或)IL-4存在的條件下形成IgA的分泌物。在巨噬細(xì)胞中,IL-10被認(rèn)為有下調(diào)IL-1、TNF-α和IL-6作用。在樹突細(xì)胞中IL-10已經(jīng)證實(shí)其利用下調(diào)刺激物和協(xié)同刺激物分子的表達(dá)來干擾抗原提呈細(xì)胞(APC)。IL-10也已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)抑制樹突細(xì)胞從單核細(xì)胞中區(qū)別出來并且促進(jìn)單核細(xì)胞成為細(xì)胞毒素CD16+巨噬細(xì)胞。大量的上皮細(xì)胞和中胚層細(xì)胞(包括NK細(xì)胞、細(xì)胞毒素(CD8+)的T細(xì)胞分泌的Th2細(xì)胞因子、CD4+CD45RA-(存儲(chǔ))Th1和Th2細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、CD5+和CD5-B細(xì)胞、樹突細(xì)胞(Peyer’s Patch-derived)、肝星狀細(xì)胞、角化細(xì)胞、黑素瘤細(xì)胞和支氣管癌癥細(xì)胞)經(jīng)證實(shí)可以產(chǎn)生IL-10。大鼠IL-10cDNA為編碼178個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì),包含一個(gè)18個(gè)氨基酸的信號(hào)肽和一個(gè)160個(gè)氨基酸的成熟蛋白。成熟的大鼠IL-10和小鼠IL-10有85%序列同源性,和人的IL-10同源性為74%。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法??勾笫驣L-10單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-10會(huì)與單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入生物素化的抗大鼠IL-10抗體,生物素化抗大鼠IL-10抗體與酶標(biāo)板結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的大鼠IL-10結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-10,辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,IL-10濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-10濃度。