產(chǎn)品概述
血管內皮生長因子(Vascular endothelialgrowth factor)又稱血管通透因子(VPF),是生長因子VEGF/PDGF家族的一個成員。VEGF基因編碼8個外顯子。由于不同剪切形式,產(chǎn)生3種同型異構體(VEGF120,VEGF164,VEGF188)。小鼠VEGF164與大鼠、犬、豬和人的氨基酸序列的同源性分別是98%、90%、87%和82%。多種細胞,包括骨骼和心肌,肝細胞,造骨細胞,嗜中性粒細胞,巨噬細胞,角朊細胞,CD34+ 細胞都能表達VEGF。在體外,VEGF是一種具有重要作用的內皮細胞有絲分裂原。在體外培養(yǎng)內皮細胞時,VEGF能激活磷酸脂酶C,誘導胞質內的自由Ca2+ 濃度增加。VEGF對單核細胞和造骨細胞也是化學趨化因子。在體內,VEGF能誘導血管生成和增加血管滲透性。基于這些體外與體內的活性,VEGF被認為在傷口愈合、胚胎發(fā)育、固體瘤的生長與轉移等過程有重要作用。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法??剐∈骎EGF單抗包被于酶標板上,同時加入標本、標準品和生物素化的抗小鼠VEGF抗體,標本、標準品中的VEGF會與加入于孔中的生物素化的抗小鼠VEGF抗體及包被于酶標板上的單抗結合,形成免疫復合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,親合素與生物素特異性結合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應孔中有VEGF,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍,加終止液變黃。在450nm處測OD值,VEGF濃度與OD450值之間呈正相關,可通過繪制標準曲線求出標本中VEGF濃度。