產(chǎn)品概述
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是一個(gè)鋅與鈣離子依賴性的肽鏈內(nèi)切酶,它們的生物學(xué)功能主要就降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)。在許多正常的生理過程,如胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、再生與組織愈合,它們都發(fā)揮著重要的功能。它們也參與許多病理過程中,如關(guān)節(jié)炎、癌癥以及心血管疾病等。新合成的MMP數(shù)量調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平,而MMP的酶切活力調(diào)控主要是通過兩個(gè)方面來實(shí)現(xiàn)的:酶原的激活與內(nèi)源性的 MMP抑制劑的抑制作用,如巨球蛋白與金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)?;|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是一個(gè)鋅與鈣離子依賴性的肽鏈內(nèi)切酶,它們的生物學(xué)功能主要就降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)。在許多正常的生理過程,如胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、再生與組織愈合,它們都發(fā)揮著重要的功能。它們也參與許多病理過程中, 如關(guān)節(jié)炎、癌癥以及心血管疾病等。新合成的MMP數(shù)量調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平,而MMP 的酶切活力調(diào)控主要是通過兩個(gè)方面來實(shí)現(xiàn)的:酶原的激活與內(nèi)源性的MMP抑制劑的抑制作用,如巨球蛋白與金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)。MMP-3也叫間充質(zhì)溶解素。多種細(xì)胞在被適當(dāng)?shù)拇碳ず?,都可以表達(dá) MMP-3,如成纖維細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、造骨細(xì)胞、角質(zhì)化細(xì)胞等等。炎癥因子如IL-1、腫瘤壞死因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板源生長(zhǎng)因子、佛波醇等等都是誘導(dǎo)試劑。而視黃酸、糖皮質(zhì)激素、雌激素、黃體酮與TGF-β都抑制MMP-3的表達(dá)。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。抗人MMP-3單抗包被于酶標(biāo)板上,同時(shí)加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和生物素化的抗人MMP-3抗體,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的MMP-3會(huì)與單抗結(jié)合,游離的成分被洗去形成免疫復(fù)合物;加入生物素化的抗人MMP-3抗體,生物素化抗人MMP-3抗體與酶標(biāo)板上結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的MMP-3結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有MMP-3,辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,MMP-3濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中MMP-3濃度。
產(chǎn)品性能
1. 靈敏度:最小可測(cè)人MMP-3達(dá)30pg/ml 。
2. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。
產(chǎn)品組分及儲(chǔ)存條件
名稱
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96 Tests
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48 Tests
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保存條件
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1. 抗體包被板條 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.標(biāo)準(zhǔn)品 (Standard)
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2 支(凍干)
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1 支(凍干)
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2-8℃
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3.濃縮生物素化抗體 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃
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4.濃縮酶結(jié)合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.試劑稀釋液 (Assay Diluent)
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3 瓶(25ml/瓶)
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2 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.濃縮洗滌液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.顯色劑 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.終止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板膠紙
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3 張
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2 張
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10.說明書
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1 份
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1 份
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試驗(yàn)所需自備儀器和試劑:
1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測(cè)波長(zhǎng)濾光片,570nm或630nm校正波長(zhǎng)濾光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸頭:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標(biāo)紙。
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