產(chǎn)品概述
白介素 8(IL-8)是嗜中性粒細(xì)胞特異性的 CXC 家族的趨化因子成員之一,是一個(gè)多功能的嗜中性粒細(xì)胞趨化因子與激活因子。它主要是個(gè)炎癥因子,在前炎癥因子(如 IL-1、TNF、LPS 與病毒)刺激后,許多細(xì)胞表達(dá)IL-8,包括T細(xì)胞、單核細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)、纖維原細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞等等。它的功能部分是趨化嗜中性粒細(xì)胞到炎癥反應(yīng)位點(diǎn)來激活它們。
人 IL-8 的 cDNA 編碼 99 個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì),22 個(gè)氨基酸信號(hào)肽被剪切后形成分子量約 8kDa 成熟體。蛋白質(zhì) N 端進(jìn)一步降解后形成 72 個(gè)氨基酸的變異體。IL-8 的完全激活可能需要剪切成 72 個(gè)氨基酸組成的形式。 IL-8 在高濃度時(shí),能形成非共價(jià)的二聚體,但這種二聚體不是生物學(xué)活性形式。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法??谷薎L-8單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-8會(huì)與單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入生物素化的抗人IL-8抗體,生物素化抗人IL-8抗體與酶標(biāo)板上結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的IL-8結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-8,辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,IL-8濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-8濃度。
產(chǎn)品性能
1. 靈敏度:最小可測(cè)人IL-8達(dá)2pg/ml 。
2. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。
產(chǎn)品組分及儲(chǔ)存條件
名稱
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96 Tests
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48 Tests
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保存條件
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1. 抗體包被板條 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.標(biāo)準(zhǔn)品 (Standard)
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2 支(凍干)
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1 支(凍干)
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2-8℃
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3.濃縮生物素化抗體 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃
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4.濃縮酶結(jié)合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.試劑稀釋液 (Assay Diluent)
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2 瓶(25ml/瓶)
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1 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.濃縮洗滌液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.顯色劑 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.終止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板膠紙
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3 張
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2 張
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10.說明書
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1 份
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1 份
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試驗(yàn)所需自備儀器和試劑:
1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測(cè)波長(zhǎng)濾光片,570nm或630nm校正波長(zhǎng)濾光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸頭:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標(biāo)紙。
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